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    蜀科台式左手视频app安卓下载制备大肠杆菌感受态细胞

    更新时间:2017-08-01      点击次数:4208

      蜀科台式左手视频app安卓下载操作简单、运行平衡、性能稳定、安全可靠,广泛应用于,放射免疫、生物化学、食品卫生、环保等科研领域。今天来科普一下如何用蜀科台式左手视频app安卓下载制备大肠杆菌感受态细胞,给各位实验室的朋友参考。
     

    1.先将受体大肠杆菌接种于LB培养基中活化,置于恒温培养箱中37℃培养过夜。。。

    2.接着取一丁点(枪头沾一下)上述大肠杆菌培养物菌落接种于3-5毫升LB试管中,于恒温振荡器上,37℃振荡培养过夜(约12-16 小时)。

    4.再是用移液管无菌条件下,取过夜培养液1 毫升,接种于新鲜的LB 中(100毫升LB/250毫升三角瓶,接种量按菌液浓度而定,一般在1%左右),于恒温振荡器上37℃培养2―3 小时。

    5.无菌条件下将上述1 毫升菌液倒入1.5毫升EP 管中(离心管应带盖并高压灭菌过),每组2支。

    6、带菌液的离心管置于冰上10 分钟,冷却菌液,平衡好,置于蜀科台式左手视频app安卓下载上,3500r/min 离心5 分钟。

    7、无菌条件下,倒去上清LB,倒斜离心管,让LB 流干,留下沉淀菌体,加入预冷的100mmol/L CaCl2溶液600微升,用微量取样器轻轻吸冲底部沉淀菌体,使其悬浮后,把2支管转为1支,摇匀后于冰浴中放置30分钟。

    8、重新将CaCl2 菌悬浮液置于蜀科台式左手视频app安卓下载上,3500r/min离心10分钟,小心侧倒掉上清CaCl2 ,留沉淀菌体。

    9、再把菌体悬浮在200 微升100mmol/L CaCl2 的溶液中,置于冰上作为转化的受体菌液。此制备的感受态细胞应在此步后1小时24小时内使用,效率比较高。

    10.在事先制备好的含50μg/ml Amp的LB 平板表面加40ml X-gal 储液和4μl IPTG储液,用无菌玻棒将溶液涂匀,置于37℃下放置3-4小时,使培养基表面的液体*被吸收,备用。

     

      上面的应用对大家有帮助吗?操作中的蜀科TD-5Z台式左手视频app安卓下载荣获2016“国产好仪器”殊荣,是国内各大实验室、、生物科技、食品环保等单位*的仪器。如果您也有需要,赶快吧!

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